| Identifikační kód |
RIV/68378050:_____/12:00387826 |
| Název v anglickém jazyce |
Quantitative evaluation of freeze-substitution effects on preservation of nuclear antigens during preparation of biological samples for immunoelectron microscopy |
| Druh |
J - Recenzovaný odborný článek (Jimp, Jsc a Jost) |
| Poddruh |
- |
| Jazyk |
eng - angličtina |
| Obor - skupina |
E - Biovědy |
| Obor |
EB - Genetika a molekulární biologie |
| Rok uplatnění |
2012 |
| Kód důvěrnosti údajů |
S - Úplné a pravdivé údaje o výsledku nepodléhající ochraně podle zvláštních právních předpisů. |
| Počet výskytů výsledku |
3 |
| Počet tvůrců celkem |
4 |
| Počet domácích tvůrců |
4 |
| Výčet všech uvedených jednotlivých tvůrců |
Pavel Hozák (státní příslušnost: CZ - Česká republika, domácí tvůrce: A, vedidk: 9671706)
Anatoly Philimonenko (státní příslušnost: CZ - Česká republika, domácí tvůrce: A, vedidk: 6029876)
Vlada Philimonenko (státní příslušnost: CZ - Česká republika, domácí tvůrce: A, vedidk: 2939711)
Margaryta Sobol (státní příslušnost: CZ - Česká republika, domácí tvůrce: A, vedidk: 6055419) |
| Popis výsledku v anglickém jazyce |
Using quantitative evaluation of immuno-gold labeling and antigen content, we evaluated various automated freeze-substitution protocols used in preparation of biological samples for immunoelectron microscopy. Protein extraction from cryoimmobilized cellswas identified as a critical point during the freeze-substitution. The loss of antigens (potentially available for subsequent immuno-gold labeling) was not significantly affected by freezing, while the cryosubstitution with an organic solvent caused a significant loss of antigens. While addition of water can improve visibility of some cell structures, it strengthened the negative effect of cryosubstitution on antigen loss by extraction. This was, however, significantly reversed in the presence of 0.5%glutaraldehyde in the substitution medium. Furthermore, we showed that the level of these changes was antigen-dependent. In conclusion, low concentrations of glutaraldehyde can be generally recommended for cryosubstitution rather than the |
| Klíčová slova oddělená středníkem |
immuno-gold labeling; automated freeze-substitution; LR White; immunohistochemistry; high-pressure freezing |
| Stránka www, na které se nachází výsledek |
- |
| DOI výsledku |
10.1007/s00418-012-0931-6 |
| Odkaz na údaje z výzkumu |
- |