| Identifikační kód |
RIV/61388971:_____/08:00312749 |
| Název v původním jazyce | Expresní vektor, pSPM-His, kódující samoštěpitelný afinitní modul odvozený z proteinu FrpC bakterie Neisseria meningitidis určený pro jednostupňovou purifikaci rekombinantních proteinů na Ni-NTA agarose |
|---|
| Název v anglickém jazyce |
Expression vector, pSPM-His, coding self-processing affinity module derived from the FrpC protein of Neisseria meningitidis for single-step purification of free recombinant proteins on Ni-NTA agarose |
| Druh |
G - Technicky realizované výsledky (prototyp, funkční vzorek) |
| Poddruh |
G/B - Funkční vzorek (Gfunk) |
| Jazyk |
cze - čeština |
| Obor - skupina |
E - Biovědy |
| Obor |
EC - Imunologie |
| Rok uplatnění |
2008 |
| Kód důvěrnosti údajů |
S - Úplné a pravdivé údaje o výsledku nepodléhající ochraně podle zvláštních právních předpisů. |
| Počet výskytů výsledku |
1 |
| Počet tvůrců celkem |
4 |
| Počet domácích tvůrců |
4 |
| Výčet všech uvedených jednotlivých tvůrců |
Irena Linhartová (státní příslušnost: CZ - Česká republika, domácí tvůrce: A, vedidk: 1195247)
Radim Osička (státní příslušnost: CZ - Česká republika, domácí tvůrce: A, vedidk: 2408902)
Lenka Sadílková (státní příslušnost: CZ - Česká republika, domácí tvůrce: A, vedidk: 2341271)
Peter Šebo (státní příslušnost: CZ - Česká republika, domácí tvůrce: A, vedidk: 1076329) |
| Popis výsledku v původním jazyce | Expresní vektor pSPM-His nese DNA fragment kódující 250 aminokyselinových zbytků dlouhý samoštěpící modul (SPM) odvozený z proteinu FrpC bakterie Neisseria meningitidis. DNA fragment pro SPM je na 3-konci fúzován ve fázi čtení se sekvencí kódující šest histidinových zbytků (His) a na 5-konci s klonovacím místem (MCS). MCS bylo navrženo tak, aby do něj mohl být klonován gen pro libovolný rekombinantní protein ve fázi čtení se sekvencí pro SPM-His, což umožňuje produkci rekombinantního proteinu fúzovanéhok SPM-His. Po produkci fúzního proteinu a jeho zachycení k Ni-NTA agarose z buněčného lyzátu jsou kontaminující proteiny odstraněny a pomocí vápenatých iontů je indukováno SPM-zprostředkované štěpení mezi rekombinantním proteinem a SPM-His. To vede k uvolnění čistého rekombinantního proteinu z matrice, na kterou zůstává navázán pouze fúzní partner SPM-His |
|---|
| Popis výsledku v anglickém jazyce |
The expression vector pSPM-His harbors a DNA fragment encoding the 250 amino acid residues long self-processing module (SPM) of the FrpC protein of Neisseria meningitidis, which is fused in frame to a sequence coding for six histidine residues (His) at the 3-terminus and to a multiple cloning sequence (MCS) at the 5-terminus. The MCS was designed for insertion of a target gene in-frame with the gene for SPM- His, thus allowing the expression of a target protein fused to SPM-His. After expression of thefusion protein and its binding to Ni-NTA agarose from a cell lysate, contaminating proteins are washed out and the SPM-mediated cleavage between recombinant protein and SPM-His is induced by calcium ions. It results in release of the free recombinant protein, while the SPM-His fusion partner remains trapped on the affinity matrix |
| Klíčová slova oddělená středníkem |
pSPM-His |
| Stránka www, na které se nachází výsledek |
- |
| DOI výsledku |
- |
| Odkaz na údaje z výzkumu |
- |